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科学·经典遗传毒理学试验表明 普洱茶抗癌不致癌(3)

发布时间:2014/3/12 10:27:16
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本研究采用经典的遗传毒理学试验方法:小鼠骨髓微核率试验、小鼠精子畸形分析试验,鼠伤寒沙门氏杆菌回复突变试验、仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验, 以晒青毛茶为对照,对不同贮藏年份的共5种代表性普洱茶产品进行了遗传毒性安全性毒理学评价,以检测其是否具有潜在的致突变和致癌毒性。​

六个茶样的小白鼠骨髓微核试验结果(如表)

普洱茶遗传毒性——微核试验结果

微核试验是根据分裂间期细胞内残留染色体断片或整个染色体组成的一种圆形或椭圆形的小体,来判断化学物质引起染色体异常作用的一种简便的哺乳动物体内试验。典型的微核呈圆形,直径相当于红细胞直径的1/5~1/20,染色与核质相同。微核出现是一种染色体异常现象,微核检出率增高,可反映染色体畸变情况。由于其测定方法较简便、快速可靠,所以已作为化学致突变试验中常用的一种筛检方法。 ​

表格上可以看出:经六个茶样灌胃处理的昆明种小白鼠,试验结果均为阴性。表明六个茶样都不存在致染色体断裂的致突变性,各茶样处理的小白鼠骨髓微核发生率均略低于空白对照,提示所试茶样均具有一定的降低微核自然发生率的功能,即所试普洱茶样具有一定的抗突变和抗癌的作用!有大量研究报道表明茶叶及其多酚类以及儿茶素类具有抗染色体损伤的功能,也有人研究发现绿茶可以降低某些重金属导致的微核率的增加。​

普洱茶遗传毒性--小白鼠精子畸形检测试验结果

精子畸形是指精子形状的畸形和畸形精子数量增多,畸形精子增多的原因可能是由于在精子形成过程中, 致突变源使精子形成有关的基因发生突变或某些特异染色体的重排。精子畸形试验根据受试化学物如能影响实验动物的精子成熟过程,则可观察到精子头部或尾部的形态变化。​

精子畸形试验是检验生殖细胞染色体毒性的一种手段,A、B、C、D、E、F六个茶样按各自得1/2 LD50、1/6 LD50、1/20 LD50各剂量处理后,其畸形精子率与阴性对照没有显著性差异,而阳性对照则比阴性对照有显著性增加,因此判定六个茶样各剂量的畸形精子检测结果为阴性,四茶样所试剂量对生殖细胞没有致畸变作用。​

Ames试验结果

鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变试验通常简称Ames试验,它是1975年由Ames本人完整地提出的用微生物检测致突变物的方法,是目前检测基因突变最常用方法之一。Ames法基本原理是鼠伤寒沙门氏杆菌的突变型(即组氨酸缺陷型)菌株在无组氨酸的培养基上不能正常生长,只有少数自发回变菌落生长。在有组氨酸的培基上可以正常生长,但在无组氨酸的培基中如有能引起该菌基因碱基置换或移码突变的致突变剂存在,则突变型发生回复突变,回变为组氨酸非缺陷型野生型,即又可在无组氨酸培基上生长,使细菌生长增多。某些致突变剂需要激活后才能引起沙门氏菌突变型发生回复突变,由大鼠肝匀浆制备的哺乳动物体内肝微粒体多功能氧化酶S9混合液进行受试化学物质的代谢激活作用。测定致突然变异性物质所引起的复归突然变异频度,即可以检查受试物是否为致突变物质。 ​

根据Ames试验结果判定准则,当试验受试物诱变的回复菌落数(X±S)增加,为自发对照的2倍或以上,并具有剂量效应或某一测试点可重复的统计学意义增加时为阳性,从六茶样四菌株各水平实验结果看,六个茶样四菌株均显阴性。因此可以得出结论为普洱茶及烘青绿茶对TA98、TAl00、TA97及TAl02四菌株不存在明显的抑菌现象,不会诱导四菌株发生回复突变,三种类型普洱茶及烘青绿茶中没有引起四菌株基因碱基置换或移码突变的致突变剂存在。​

CHL染色体畸变试验结果

用CHL染色体畸变试验评价F、E两个普洱茶样的致突变性本试验结果表明,无论是24h及48h收获细胞进行染色体畸变分析,空白对照、溶媒对照、S9混合液对照染色体畸变率在正常范围,在S9活化和非活化两种测试条件下,普洱茶E在试验设计浓度范围内染色体畸变率都在正常范围,证明了普洱茶E、F在设计剂量条件下对CHL细胞没有致突变性。